Романный набор Coronavirus (2019-nCoV) нуклеиновый кисловочный диагностический
(Прощупывание PCR-флуоресцирования)
Предполагаемое использование
Набор Coronavirus романа (2019-nCoV) нуклеиновый кисловочный диагностический (прощупывание PCR-флуоресцирования) использован для качественного обнаружения генов ORF1ab и n романного coronavirus (2019-nCoV) в носоглоточной пробирке, oropharyngeal пробирке, луночной жидкости лаважа, мокроте, сыворотке, всей крови и фекалиях от заподозренных случаев пневмонии с романной инфекцией coronavirus, пациентах с заподозренными группами романной инфекции coronavirus, и других пациентах требуя диагноза или дифференциального диагноза романной инфекции coronavirus.
Для in vitro диагностической пользы только. Для профессиональной пользы только.
Принцип теста
Путем приложение технологии флуоресцирования в реальном времени количественной RT-PCR на аппаратуре PCR флуоресцирования количественной, этот тест использует романное coronavirus (2019-nCoV) ORF1ab и специфическую сохраненную последовательность кодировать ген n протеина nucleocapsid как зоны мишеней которые конструированы для сохраненной последовательности генов двух-цели, для того чтобы достигнуть обнаружения РИБОНУКЛЕИНОВОЙ КИСЛОТЫ образца через дневные изменения сигнала.
Система обнаружения PCR использует положительный внутренний контроль, который контролирует присутсвие иов АБС битор PCR в образцах теста путем обнаруживать ли сигнал внутреннего контроля нормален, для избежания ложного отрицательного результата.
Компоненты диагностического набора
Этот набор реагент реакции амплификации и содержит следующие компоненты:
| Нет. |
Имя реагента |
Спецификации. & Qty |
Главные ингредиенты |
| 24 t |
48 t |
| 1 |
смешивание 2019-nCov-PCR |
624µL/tube x 1 |
1248µL/tube x 1 |
Премьер-министры (4,62%), зонды (1,15%), dNTPs (3,85%), MgCl2 (0,77%), Rnasin (0,48%), буфер PCR (89,13%) |
| 2 |
смешивание 2019-nCov-PCR-Enzyme |
96µL/tube x 1 |
192µL/tube x 1 |
Энзим RT (62,5%),
Энзим Taq (37,5%)
|
| 3 |
контроль 2019-nCov-PCR-Positive |
500µL/tube x 1 |
500µL/tube x 1 |
In vitro Transcriptional РИБОНУКЛЕИНОВАЯ КИСЛОТА содержа гены цели (ген ORF1 ab, n) и внутренние стандартные части гена (рНКазу p) |
| 4 |
контроль 2019-nCov-PCR-Negative |
500µL/tube x 1 |
500µL/tube x 1 |
Нормальное соляное |
Метод теста
Подготовка реагента (выполненного на «регионе подготовки реагента ")
Примите вне каждый компонент от диагностического набора и установите их на комнатной температуре. Позвольте реагентам эквилибрировать на комнатной температуре, тогда вортексе каждом их соответственно для последующего использования.
Согласно количеству образцов теста, контроль 2019-nCoV-PCR-Positive и контроль 2019-nCoV-PCR-Negative, количество пипетки соотвествующее смешивания 2019-nCoV-PCR и смешивание 2019-nCoV-PCR-Enzyme (смешивание 2019-nCoV-PCR смешивание 4μL/test PCR-энзима 26μL/test + 2019-nCoV-), смешивают их тщательно для того чтобы сделать PCR-Mastermix, центрифугуют его мгновенно для последующего использования.
| Деталь |
1 образец |
10 образцов |
24 образца |
48 образцов |
| смешивание 2019-nCoV-PCR (μL) |
26 |
260 |
624 |
1248 |
| смешивание 2019-nCoV-PCR-Enzyme (μL) |
4 |
40 |
96 |
192 |
| Примечание: Вышеуказанная конфигурация как раз для вашей ссылки а обеспечить достаточный том PCR-Mastermix, больше тома фактический капать из пипетки может необходим. |
Перенесите над-подготовленные реагенты к «образцу обрабатывая регион» для последующего использования.
Амплификация PCR (см. руководство потребителя каждой аппаратуры для того чтобы отрегулировать установки.)
Трубки реакции PCR места в колодцы образца оборудования амплификации. Настройте контроль 2019-nCoV-PCR-Positive, контроль 2019-nCoV-PCR-Negative и образцы, который нужно испытать в соответствуя имени образца последовательности и входного сигнала.
Отборный канал теста PCR:
A. отборные каналы FAM (региона ORF-1ab) и ROX (гена n) для того чтобы испытать нуклеиновую кислоту 2019-nCoV.
B. отборный канал НАГОВОРА для того чтобы испытать внутренний контроль.
Установленные параметры цикла
| Нет. |
Шаги |
Температура |
Время |
Цикл нет. |
| 1 |
Обратная транскрипция |
50°C |
30 MIN. |
1 |
| 2 |
predenaturation cDNA |
95°C |
1 MIN. |
1 |
| 3 |
Denaturation |
95°C |
sec 15. |
45 |
| Собрание отжига, расширения и флуоресцирования |
60°C |
30 sec.* |
| 4 |
Охлаждать прибора |
25°C |
sec 10. |
1 |
Когда установки завершены, сохраните установки и унесите процедуру по реакции.
Анализ результата (см. руководство потребителя аппаратуры для того чтобы отрегулировать установки.)
Результаты будут сохранены автоматически когда реакции будут завершены. Проанализируйте кривую усиления цели обнаружения и внутреннего контроля. Отрегулируйте начало, конец и пороговые значения базиса диаграммы согласно результату анализа (потребители могут отрегулировать значения согласно обстановке на данный момент. Значение начала может быть установило между 3-15, и конечным значением между 5-20. Отрегулируйте кривую усиления отрицательного контроля для того чтобы быть квартирой или под порогом). Нажмите «для того чтобы проанализировать» для того чтобы снабдить анализ, убеждайтесь каждый параметр для того чтобы удовлетворять требования уступанные «проверка качества 5.». Пойдите к окну «плиты» записать качественные результаты.
Проверка качества
| Деталь |
контроль 2019-nCoV-PCR-Negative |
контроль 2019-nCoV-PCR-Positive |
| Значение CT |
Отсутствие Ct или Ct > 40 на канале FAM, ROX и НАГОВОРЕ
(Внутренний контроль)
|
≤ 35 на канале FAM, ROX и НАГОВОРЕ
(Внутренний контроль)
|
Результат теста обработан как действительное если все условия в вышеупомянутом соотвествованы для такого же теста. В противном случае результату теста обработан как инвалидный и нужно быть испытанным повторно.
Ряд ссылки
Через исследование на значениях ссылки, определены, что будет определены, что будет значение ссылки Ct гена цели 40, значение ссылки CT внутреннего контроля 40.
Объяснение результата обнаружения
| Заключение |
Результаты амплификации |
| позитв 2019-nCoV |
Типичная кривая усиления S-формы обнаруженная на канале FAM и/или ROX, и кривая усиления которая обнаружена на канале НАГОВОРА, Ct≤40. |
| недостаток 2019-nCoV |
Никакая типичная кривая усиления S-формы (отсутствие Ct) или Ct > 40 обнаруженное на канале FAM и ROX, и кривая усиления которая обнаружена на канале НАГОВОРА, ≤ 40 Ct. |
Никакая типичная кривая усиления S-формы обнаруженная на канале FAM, ROX и НАГОВОРА (отсутствие Ct), или Ct > 40. Показано что концентрация образца слишком низка, или мешая вещества которые блокируют реакцию. Результат теста инвалидн. Исследование должно быть выполнено для того чтобы узнать и исключить причины, пожалуйста собирает образец снова и испытывает повторно образцы.
Примечание: Для культур вируса, никакие требования для результатов теста внутреннего контроля.
Индекс эксплуатационных характеристик продукта
Точность
Ссылка предприятия теста положительная, результаты все положительна.
Характерность
Для романного набора Coronavirus (2019-nCoV) нуклеинового кисловочного диагностического (прощупывания PCR-флуоресцирования), также отсутствие перекрестной реакции с coronavirus (NL63, HKU1, 229E, OC43), coronavirus SARS, coronavirus MERS, инфлуензой вирус, типом Yamagata вируса b инфлуензы и типом Виктория, вирусом инфлуензы a (H1N1), вирусом инфлуензы a (H3N2), вирусом инфлуензы a (H5N1), вирусом инфлуензы a (H7N9), дыхательным синцитиальным типом a вируса и типом b, носовым типом a вируса, типом b и типом c, типом 1 аденовируса, 2, 3, 4, 5, 7 и 55, типом 1 вируса парагриппа, 2 и 3, кишечный тип a вируса, тип b, тип c (EV-C95), тип d (EV-D70), частично легочный вирус, человеческий вирус легкего, neoformans криптококка, пиогенный стрептококк, baumannii acinetobacter, carinii pneumocystis, pneumoniae klebsiella, стрептококк pneumoniae, hemophilus - influenzae, псевдомонасы - aeruginosa, pneumophilia legionella, Bordetella Pertussis, золотистый стафилококк, пневмония pneumoniae микоплазмы, стрептококк pneumoniae, pneumoniae klebsiella, чламидия, вирус EB, человеческий вирус cytomegalo, fumigatus аспергилла, albicans кандиды, glabrata кандиды, туберкулез микобактерии, не-натечная микобактерия, norovirus, ротавирус, вирус zoster varicella, вирус кори, вирус заушницы, образцы ДНК etc. человеческого генома положительные. Испытайте ссылку предприятия отрицательную, результат все отрицательный.
Точность:
Коэффициент вариации (CV%) значения CT осуществляемой в пределах точности ≤5%.
Клиническая оценка основана на рекомендует метод «романного проводника технологии лабораторных испытаний пневмонии инфекции Coronavirus», «романная контролирующая программа случаев пневмонии инфекции Coronavirus (второе издание)» к диагнозу/результату исключения как сравнение, в военном Cademy военного института медицинского исследования, контроля распространения болезней Хунани и центра предохранения, больницы людей провинции Хунань, центральной больницы Xiangya южного университета 2-ой, согласно клиническим данным собранным от 4 заведений, как статистический анализ, предварительная оценка, основное клиническое подтвердила эксплуатационные характеристики продукта может отвечать аварийные потребностямы. Типы образцов для клинической оценки включили pharyngeal пробирки и луночный лаваж. Более новые клинические данные будут собраны после выходить на рынок для того чтобы подтвердить клиническое представление продукта.
Должный к характеристикам пробирки самой и другого образца собрания процесса и вирусных инфекции процесса, ложные отрицательные результаты могут быть причинены недостаточным томом образца, который должен быть совмещен с другими клиническими диагнозом и данными по обработки для всестороннего суждения, испытывают повторно в случае необходимости.
Хранение и стабильность
Диагностический набор должен храниться в опечатанной вализе at-20±5°C и защищаться от света. Набор provisionally действителен на 6 месяцев.
Пожалуйста см. дата изготовления и срок годности на наружном пакете.
Реагенты держат действительный и стабилизированный внутри срок годности если не использованный. Покуда контейнер реагента раскрыт, замораживание/циклы таяния не должны превысить 3.
Совместимая аппаратура
Диагностический набор применим к SLAN-96P, ABI7500, технологиям QuantStudio TM5 жизни, RocheCobas480, аппаратураPCRMA-6000.
Ваше сообщение должно содержать от 20 до 3000 символов!
